ПХ анализатор проблемаларны чишү: еш бирелә торган сораулар һәм чишелешләр

Полимераз чылбыры Ләкин, теләсә нинди катлаулы җайланма кебек, ПХ анализ җитештерүче аның эшенә тәэсир итүче проблемалар белән очрашырга мөмкин. Бу мәкаләдә кайбер уртак сораулар мөрәҗәгать итәПХ анализаторПроблеманы чишү һәм гомуми проблемаларга практик чишелешләр бирә.

1. Нигә минем PCR реакциясе көчәйтми?

Кулланучылар алдында торган иң еш очрый торган проблемаларның берсе - DNA максатыннан көчәйтү өчен PCR реакциясенең сәләтсезлеге. Бу берничә фактор белән бәйле рәвештә:

Дөрес булмаган пример дизайн: праймеризның максат эзлеклелеге өчен конкрет, оптималь эретү температурасы (tm). Яңартылган миссиядән саклану өчен пример дизайн өчен программа коралларын кулланыгыз.

Шаблон ДНК җитми: Сез җитәрлек күләмдә шаблон днаны кулланганыгызны тикшерегез. Бик аз, зәгыйфь яки бер көчә китермәячәк.

Aboberәяүлелектә ингидаторлар: үрнәктәге пычраткыч матдәләр PCR реакциясен тыя ала. ДНКны чистартуны яки бүтән чыгаруны кулланып карагыз.

Чишелеш: пример сезнең призизацияне тикшерегез, шаблон концентрациясен карагыз, һәм сезнең үрнәкнең ингибиторларның булмаганын тикшерегез.

2. Нигә минем pr продуктым дөрес булмаган зурлыкта?

Әгәр сезнең PCR продуктының зурлыгы көтелгәнчә булмаса, бу реакция шартлары яки кулланылган ингредиентлар белән проблеманы күрсәтергә мөмкин.

Конкрет булмаган Амплификация: Бу пример уйланмаган сайтка бәйләсә, булырга мөмкин. Праймерның үзенчәлеген шартлау кебек корал кулланып тикшерегез.

Ялгыш анналь тикшерү температурасы: Әгәр дә дару инкарпературасы бик түбән булса, конкрет булмаган мәҗбүри булырга мөмкин. Градиент буенча анналь антологик температураны оптимальләштерү.

Чишелеш: PZ продуктларының төгәллеген яхшырту өчен праймериз спецификасын раслагыз һәм оптималь температураны оптимальләштерегез.

3. Минем ПХ анализатор хата хәбәрен күрсәтә. Мин нәрсә эшләргә тиеш?

ПХ анализаторындагы хата хәбәрләре куркыныч булырга мөмкин, ләкин алар еш кына потенциаль проблемаларга мәгълүмат бирә ала.

Калибрлау проблемалары: ПХ анализаторының дөрес калибры булуына инаныгыз. Төгәл нәтиҗәләр алу өчен регуляр хезмәт күрсәтү һәм калибрлау тикшерүләре мөһим.

Программа төркеме: Кайвакыт, программа тәэминаты проблемалар тудырырга мөмкин. Компьютерыгызны яңадан эшләтеп җибәрегез һәм программа яңартуларын тикшерегез.

Чишелеш: конкрет хата коды өчен кулланучының кулланмасына карагыз һәм тәкъдим ителгән проблемаларны чишү адымнары. Даими хезмәт күрсәтү күп проблемаларны булдыра ала.

4. Нигә минем PCR реакциясе нәтиҗәләре туры килми?

PCRessientent Prves берничә сәбәп аркасында күңелсезләнергә мөмкин:

Регент сыйфаты: барлык реагентларның, шул исәптән ферментлар, буферлар, днтс, яңа һәм югары сыйфатлы булуын тәэмин итү. Срогы яки пычратылган реагентлар үзгәрүчәнлеккә китерергә мөмкин.

Термаль циклер калибрлау: төп температура көйләүләре PCR процессына тәэсир итә ала. Җылылык циклының калибрлавын регуляр рәвештә тикшерегез.

Чишелеш: эзлекле нәтиҗәләрне тәэмин итү өчен җылылык циклын кулланыгыз.

5. PCR реакция нәтиҗәлелеген ничек яхшыртырга?

PCR реакцияләренең эффективлыгын күтәрү югарырак уңышларга һәм ышанычлы нәтиҗәләргә китерергә мөмкин.

Реакция шартларын оптимальләштерү: праймерларның төрле концентрацияләрен, ДНК ДНКны һәм MGCL2 төрле концентрацияләрен кулланып эксперимент. Eachәрбер PCR реакциясе оптималь эш өчен уникаль шартлар таләп итә ала.

Highгары Туганлык ферментларын кулланыгыз: Әгәр төгәллек тәнкыйтьләсә, бер тугрылыклы Dna полимеразасын көчәйтү өчен уйлагыз.

Чишелеш: Сезнең ПХР Урнаштыру өчен иң яхшы шартларны табу өчен оптимизация экспериментын эшләгез.

Йомгаклау

Проблеманы чишү аПХ анализаторПаутлы эш булырга мөмкин, ләкин уртак проблемаларны аңлау һәм аларның чишелешләре сезнең PCCR тәҗрибәсен сизелерлек арттыра ала. Бу уртак проблемаларны чишеп, тикшерүчеләрнең PCR нәтиҗәләрен яхшыртырга һәм молекуляр биология кушымталарында ышанычлы нәтиҗәләрне тәэмин итә алалар. Даими хезмәт күрсәтү, реагентларны җентекләп сайлау, һәм реакция шартларын оптимальләштерү PZR анализы ачкычлары.