Summerәйге фән өчен кулланма: 40 ° C җылылык дулкыны молекуляр экспериментлар белән очрашканда

Күптән түгел Кытайның зур өлешендә югары температура дәвам итте. 24 июльдә, Шаньдун провинция метеорология обсерваториясе сары югары температура турында хәбәр бирде, "саунага охшаган" температураны 35-37 ° C (111-133 ° F) һәм киләсе дүрт көн эчендә эчке районнарда 80% дымлылык фаразлый. Турпан, Синьцзян кебек урыннардагы температура 48 ° C (111-133 ° F) якынлаша. Вухан һәм Сяоган, Хубей, кызгылт сары төстә, кайбер өлкәләрдә температура 37 ° C тан артык. Бу эссе эсселектә, пипеталар өслегендәге микроскопик дөнья гадәти булмаган тәртипсезлекләр кичерә - нуклеин кислоталарының тотрыклылыгы, ферментларның активлыгы, реагентларның физик торышы барысы да җылылык дулкыны белән тыныч кына бозыла.

Нуклеин кислотасын чыгару вакытка каршы ярышка әйләнде. Ачык һава температурасы 40 ° C-тан артканда, хәтта кондиционер булса да, эш өстәленең температурасы еш 28 ° C-тан күтәрелә. Бу вакытта, РНК үрнәкләре ачык деградада яз һәм көзгә караганда икеләтә күбрәк. Магнит мишәр чыгаруда, буфер эремәсе эретүченең тиз үзгәрүчәнлеге аркасында җирле туенган, һәм кристалллар җиңел яуган. Бу кристаллар нуклеин кислотасын алу эффективлыгында зур үзгәрүләргә китерәчәк. Органик эреткечләрнең үзгәрүчәнлеге бер үк вакытта арта. 30 ° C температурада хлороформ ватилизациясе күләме 25 ° C белән чагыштырганда 40% ка арта. Эш вакытында, ягулык капкасында җил тизлегенең 0,5 м / с булуын тәэмин итәргә, һәм саклану эффективлыгын саклап калу өчен нитрил перчаткаларын кулланырга кирәк.

PCR экспериментлары тагын да катлаулырак температураның бозылуына очрый. Так ферменты һәм кире транскриптаз кебек реагентлар кинәт температураның үзгәрүенә бик сизгер. Труба стеналарындагы конденсация -20 ° C туңдыргычтан чыгарылганнан соң, реакция системасына керсә, 15% тан артык фермент активлыгын югалтырга мөмкин. dNTP чишелешләре шулай ук ​​бүлмә температурасына 5 минут тәэсир иткәннән соң ачыклана торган деградацияне күрсәтә ала (> 30 ° C). Приборларның эшләве дә югары температурада комачаулый. Лабораториянең әйләнә-тирә температурасы> 35 ° C булганда һәм PCR коралының җылылык таратуы җитәрлек булмаганда (дивардан <50 см), эчке температура аермасы 0,8 ° C кадәр булырга мөмкин. Бу тайпылыш 96 кое тәлинкә читендәге көчәйтү эффективлыгын 40% тан киметергә мөмкин. Тузан фильтрлары даими чистартылырга тиеш (тузан туплау җылылыкның таралу эффективлыгын 50% ка киметә), һәм туры кондиционердан сакланырга кирәк. Моннан тыш, PCR экспериментларын бер төн үткәргәндә, PCR коралын үрнәкләрне саклау өчен "суыткыч" итеп кулланмагыз. 4 ° C температурада 2 сәгатьтән артык саклау, җылытылган капка ябылганнан соң, конденсация барлыкка килергә мөмкин, реакция системасын эретә һәм коралның металл модулларын бозарга мөмкин.

Даими югары температуралы кисәтүләр белән молекуляр лабораторияләр дә сигнализация яңгыратырга тиеш. Кыйммәтле РНК үрнәкләре -80 ° C туңдыргыч артында сакланырга тиеш, югары температура чорына керү мөмкинлеге чикләнгән. Көненә биш тапкыр -20 ° C туңдыргычның ишеген ачу температураның үзгәрүен көчәйтәчәк. Heatгары җылылык китерә торган җиһаз ике ягында да, арткы ягында да ким дигәндә 50 см җылылык тарату урыны таләп итә. Моннан тыш, эксперименталь вакытны реструктуризацияләү тәкъдим ителә: РНК алу һәм qPCR йөкләү кебек температурага сизгер операцияләр өчен 7: 00-10: 00 AM. Мәгълүмат анализы кебек эксперименталь булмаган эш өчен 1: 00-4: 00 PM. Бу стратегия югары температураның иң югары нокталарын критик адымнарга комачаулый ала.

Heatылылык дулкыны вакытында молекуляр экспериментлар - техниканы да, сабырлыкны да сынау. Summerәйге туктаусыз кояш астында, бәлки, пипеткагызны куярга һәм коралга күбрәк җылылык таратыр өчен, үрнәкләрегезгә боз тартмасы өстәргә вакыт. Температураның үзгәрүенә карата бу хөрмәт нәкъ җәй айларында иң кыйммәтле лаборатория сыйфаты - җәйнең 40 ° C эссесендә хәтта молекулалар да сакчыл "ясалма поляр өлкәсе" кирәк.