Җәйге фәнни кулланма: 40°C җылылык дулкыны молекуляр экспериментлар белән очрашканда

Соңгы вакытта Кытайның күпчелек өлешендә югары температура саклана. 24 июльдә Шаньдун провинциясе метеорология обсерваториясе сары төстәге югары температура турында кисәтү чыгарды, анда алдагы дүрт көн эчендә эчке районнарда 35-37°C (111-133°F) "сауна сыман" температура һәм 80% дымлылык фаразлана. Синьцзянның Турпан кебек урыннарында температура 48°C (111-133°F) якынлаша. Ухань һәм Хубэйның Сяогань шәһәрләрендә кызгылт сары төстәге кисәтү бар, кайбер районнарда температура 37°C тан артып китә. Бу эсселектә пипеткалар өслеге астындагы микроскопик дөнья гадәти булмаган бозылуларны кичерә - нуклеин кислоталарының тотрыклылыгы, ферментларның активлыгы һәм реагентларның физик халәте эсселек дулкыны белән тыныч кына бозыла.

Нуклеин кислотасын чыгару вакыт белән ярышка әйләнде. Тышкы температура 40°C тан артканда, хәтта кондиционер кабызылганда да, операция өстәленең температурасы еш кына 28°C тан югарырак була. Бу вакытта ачык һавада калдырылган РНК үрнәкләре яз һәм көзгегә караганда ике тапкыр тизрәк таркала. Магнитлы шарчыклар белән чыгаруда, буфер эремәсе эреткечнең тизләтелгән очып китүе аркасында җирле рәвештә туендырыла, һәм кристаллар җиңел чөкмәгә әйләнә. Бу кристаллар нуклеин кислотасын тоту нәтиҗәлелегендә зур тирбәнешләргә китерә. Органик эреткечләрнең очып китүчәнлеге бер үк вакытта арта. 30°C температурада хлороформның очып китү күләме 25°C белән чагыштырганда 40% ка арта. Эш вакытында төтен капкачындагы җил тизлегенең 0,5 м/с булуын тәэмин итәргә һәм саклау нәтиҗәлелеген саклап калу өчен нитрил перчаткалар кулланырга кирәк.

ПЦР экспериментлары тагын да катлаулырак температура бозылулары белән очраша. Taq ферменты һәм кире транскриптаза кебек реагентлар кинәт температура тирбәнешләренә бик сизгер. -20°C туңдыргычтан алынганнан соң, трубка стеналарында конденсация реакция системасына керсә, фермент активлыгының 15% тан артык югалуына китерергә мөмкин. dNTP эремәләре бүлмә температурасында (>30°C) нибары 5 минут торганнан соң да ачыклана торган таркалуны күрсәтә ала. Җиһазлар эшләве югары температуралар белән дә тоткарлана. Лаборатория тирәсендәге температура >35°C булганда һәм ПЦР инструментының җылылык тарату аралыгы җитәрлек булмаганда (стенадан <50 см), эчке температура аермасы 0,8°C га кадәр җитәргә мөмкин. Бу тайпылыш 96 коелы пластина кырыенда көчәйтү нәтиҗәлелегенең 40% тан артык кимүенә китерергә мөмкин. Тузан фильтрларын даими чистартырга кирәк (тузан туплану җылылык тарату нәтиҗәлелеген 50% ка киметә), һәм турыдан-туры кондиционерлаудан сакланырга кирәк. Моннан тыш, төнлә ПЦР экспериментларын үткәргәндә, ПЦР инструментын үрнәкләрне саклау өчен "вакытлыча суыткыч" буларак кулланудан сакланыгыз. 4°C температурада 2 сәгатьтән артык саклау җылытылган капкач ябылгач, конденсация барлыкка килүгә китерергә мөмкин, бу реакция системасын сыекландырырга һәм җайланманың металл модульләрен коррозиягә китерергә мөмкин.

Югары температура турында даими кисәтүләр белән очрашканда, молекуляр лабораторияләр дә куркыныч янарга тиеш. Кыйммәтле РНК үрнәкләрен -80°C температурадагы туңдыргычның арткы өлешендә сакларга кирәк, югары температура чорында гына керү мөмкин. -20°C температурадагы туңдыргычның ишеген көненә биш тапкырдан артык ачу температура тирбәнешләрен көчәйтәчәк. Югары җылылык бирүче җиһазлар өчен ике яктан да, арткы яктан да ким дигәндә 50 см җылылык тарату урыны кирәк. Моннан тыш, эксперимент вакытын үзгәртү тәкъдим ителә: РНК чыгару һәм qPCR йөкләү кебек температурага сизгер операцияләр өчен иртәнге 7:00-10:00; мәгълүматларны анализлау кебек эксперименталь булмаган эшләр өчен көндезге 1:00-4:00. Бу стратегия югары температура пикларының мөһим адымнарга комачаулавын нәтиҗәле рәвештә булдырмаска ярдәм итә ала.

Эсселек вакытында молекуляр экспериментлар техниканы да, сабырлыкны да сынау булып тора. Җәйге кояшның аяусыз ыссыклары астында, бәлки, пипеткагызны куеп, прибор күбрәк җылылык чыгарсын өчен үрнәкләргә өстәмә боз тартмасы өстәргә вакыт җиткәндер. Температура тирбәнешләренә карата бу хөрмәт эссе җәй айларында лабораториядә иң кыйммәтле сыйфат булып тора - чөнки җәйнең 40°C эсселегендә хәтта молекулаларга да игътибар белән сакланган "ясалма поляр өлкә" кирәк.